ساخت باکیلوویروس نوترکیب کد کننده توأم پروتئین های هماگلوتینین، نورآمینیداز و ماتریکس ویروس آنفلوانزای h۱n۱ خوکی و بیان آن در سلول های حشرات

Authors

فریدا بهزادیان

farida behzadian research senter for sciences and biotechnology,tehran, iran, p.o.box 15875-1774پژوهشکده علوم و فن آوری زیستی ، گروه مهندسی ژنتیک ، لویزان، صندوق پستی 1774- زهرا گودرزی

zahra goodarzi applied virology research center, baqyatallah univesity of medical sciences , tehran, iranمرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... ، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه صنعتی مالک اشتر (malek ashtar university of technology) اسماعیل صابرفر

esmaiel saberfar applied virology research center, baqyatallah univesity of medical sciences , tehran, iranمرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی ، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... ، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (baqiyatallah university of medical sciences)

abstract

زمینه و هدف:تغییرات ژنتیکی ویروس آنفلونزا، هر ساله باعث ایجاد اپیدمی های جدید در سراسر دنیا می شود. ساخت یک واکسن جدید به منظور پیش گیری از ویروس آنفلونزا در چند سال اخیر هدف اصلی پژوهشگران بوده است. هدف ما از این پژوهش،ساختن باکیلوویروس نوترکیبی است که بتواند دو گلیکوپروتئین سطحی آنتی ژنیک هماگلوتینین و نورآمینیداز، به همراه پروتئین ماتریکس ویروس آنفلوانزاینوع a را به طور مستقل بیان نماید. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، ابتدا کاست سه گانه ای که بیان هم زمان و مستقل سه ژن هماگلوتینی، نورآمینداز و پروتئین ماتریکس را تأمین نماید، طراحی و سنتز شد. این کاست سپس در پلاسمید دهندهpfastbac1 کلون شد تا به پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 دست بیابیم. کلون مذکور در میزبان e.coli dh10bac با انجام ترانسپوزیشن همسان، بکمید نوترکیب را ساخت. این سازه پس از تائید با pcr، برای تکوین باکیلوویروس نوترکیب در سلول های حشرات sf9 تراریخت شد. یافته ها: نتایج هضم آنزیمی، کلونینگ صحیح پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 را تایید نمود. طول صحیح نواحی تکثیر یافته هدف بر روی بکمید نوترکیب،دلیل بر صحت نوترکیبی همسان بین پلاسمید دهنده pfastbaci hnm1 و بکمید موجود در e.coli dh10bac بود. آثار ضایعات سلولی sf9 به دنبال تراریختی با بکمید نوترکیب، نشان دهنده تکوین موفق باکیلوویروس نوترکیب بود.آنالیز پروتئین های این سلول ها نشان داد هر سه پروتئین هدف به طور مؤثر و هم زمان بیان یافته اند. نتیجه گیری: باکیلوویروس نوترکیب ساخته شده در این طرح ویژگی های درست جهت قابلیت استفاده در تولید ذرات شبه ویروسی آنفلوانزا ویژه استرین خوکی را دارد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ساخت بکمیدهای نوترکیب واجد ژن هماگلوتینین ویروس آنفلوانزای انسانی

هدف: ویروس آنفلوانزای a (h1n1) از مهم‏ترین زیرگونه‏های ویروس آنفولانزاست که منجر به پیامدهای متعددی در جهان شده است. هماگلوتینین یکی از مهم‏ترین آنتی‏ژن‏های این ویروس می‏باشد که باعث ایجاد پاسخ ایمنی می‏شود. اتصال این پروتئین به گیرنده‏های سلول میزبان منجر به شروع فرایند بیماری‏زایی می‏شود. با توجه به نقش حیاتی مرحله اتصال ویروسی، این پژوهش درصدد استخراج و جای‏سازی ژن هماگلوتینین و زیرواحد بزرگ...

full text

طراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی

لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداری‏های صنعتی مشاهده می‏شود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارت‏‏های اقتصادی قابل توجه در گله می‏شود. کنترل عفونت‏های ناشی از BLV با انجام آزمایش‏های سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام می‏گردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...

full text

بیان و خالص سازی پروتئین کایمر نوترکیب (3M2e-HA2) واجد نواحی حفاظت شده هماگلوتینین و پروتئین ماتریکس ویروس آنفلوانزا در راستای تولید واکسن زیرواحدی جهانی

Background and purpose: Influenza virus is one of the most important respiratory infectious agents. Viral antigenic variations are major problems for vaccine production process. At present, many researches have focused on conserved domains of influenza virus antigenic peptides for subunit vaccine development. Hemagglutinin small subunit (HA2) and the 23 amino acid extracellular N-terminal domai...

full text

نقش ژن نورآمینیداز در بیولوژی ویروس آنفلوانزا

نور آمینیداز جز گلیکوپروتئین های کلاس II است که انتهای آمینی آن در داخل ویریون و انتهای کربوکسیل آن در خارج قرار دارد. این گیلکوپروتئین توسط قطعه شش RNA کد می شود. این ژن حدود 1413 نوکلئوتید طول دارد و پروتئین حاصل از آن از 453 آمینواسید تشکیل شده است. عموما به ازای هر یک ملکول نورآمینیداز (NA ) در سطح ویروس پنج مولکول هماگلوتینین (HA ) قرار دارد اما  این نسبت بین تحت تیپ های ویروس متفاوت است ن...

full text

جداسازی و کلونینگ ژن نورآمینیداز ویروس آنفلوانزا a (h۱n۱ سویهnew caledonia ) در وکتور بکمید به منظور ساخت باکیولوویروس نوترکیب

زمینه و هدف: در سال‎های اخیر ویروس آنفلوانزا باعث عفونت‎های متوسط تا شدید با میزان پراکندگی وسیع در سرتاسر دنیا شده است. بر این اساس، واکسن آنفلوانزایی که تنها یک دوز آن محافظت ایجاد نماید هنوز در دسترس نیست. بنابراین، تهیه یک واکسن عمومی و فراگیر بر اساس ذرات شبه ویروسی غیرتکثیری ایده‎ال می‎باشد. در تحقیق حاضر یکی از سازه‎های مولکولی برای ساخت این ذرات مد نظر قرار گرفته است. مواد و روش‎ها: در ...

full text

بیان و خالص سازی پروتئین کایمر نوترکیب (۳m۲e-ha۲) واجد نواحی حفاظت شده هماگلوتینین و پروتئین ماتریکس ویروس آنفلوانزا در راستای تولید واکسن زیرواحدی جهانی

سابقه و هدف: ویروس آنفلوانزا یکی از مهم‏ترین عوامل عفونی در سراسر جهان است که تغییرات آنتی‏ژنیک آن چالش بزرگی در مسیر تولید واکسن می‏باشد. در حال حاضر اکثر پژوهش‏ها بر روی توسعه واکسن‏های زیرواحدی حاصل از پپتیدهای آنتی‏ژنیک حفاظت شده ویروس متمرکز شده است. زیر واحد کوچک مولکول هماگلوتینین (ha2) و بخش آمینی خارج سلولی پروتئین کانال یونی (m2e) با 23 اسید آمینه، در همه ویروس‏های آنفلوانزای a انسانی...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۵، شماره ۸، صفحات ۱۶-۲۵

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023